ディテクター（検出器）としては目的とする物質の性質に応じて光学的性質（吸光度、屈折率、蛍光等）、電気化学的性質、質量分析法などを利用する装置がある。
ディテクターから出力された、電気信号を記録し、そこからピークを検出、解釈を行う。結果は、感熱紙等に印字される。装置のコントロールをしないのであれば、どのメーカーの物を使用しても問題はないが、通常は、装置のコントロールも同時に行うため、同じメーカーの物を選択する。
. HPLC separation of a mix of flavonoids with UV/Vis detection at 360 nm and, during the inset, at 260 nm. The choice of wavelength affects each analyte’s signal.
The obvious way to respect the theoretical and the practical specifics reviewed On this part is to cautiously examine a standard analytical approach.
The choice of the column form depends on the physicochemical Qualities with the analytes getting separated.
. In the load posture a sample loop—which is accessible in many different sizes starting from 0.5 μL to 5 mL—is isolated with the cellular stage and open towards the environment. The sample loop is filled using a syringe with a ability a number of times that of the sample loop, with excessive sample exiting with the waste line.
Not For Scientific Use
前述した従来の順相タイプに対して、逆相クロマトグラフィーにおいては固定相に低極性のもの（例えばシリカゲルにアルキル基を共有結合させたもの）を、移動相に高極性のもの（例えば水や塩類の水溶液、アルコール、アセトニトリルなどの有機溶媒）を用いる。また珍しいケースではあるが、分離のための移動相pHをシリカゲルの使用範囲から外れたところに設定する必要がある場合、あるいはシリカゲル表面に残っている未反応シラノール基が分離に悪影響を及ぼし、かつそれが移動相の変更によっても解決できない場合には、固定相として樹脂を用いることがある。分析物はより極性の低いほどより強く固定相と相互作用して溶出が遅くなる。また極性の低い物質の割合が多い移動相ほど溶出が早くなる。
The information acquisition system controls the HPLC instrument and collects the signal within the detector. This facts is shown as being a chromatogram, a graph demonstrating peaks equivalent to the divided analytes.
High-performance liquid chromatography (HPLC) is a robust analytical strategy for separating and pinpointing components in a mix. Obtaining correct and trustworthy success necessitates cautious awareness to every step with the Examination, from sample preparation to knowledge interpretation.
Altering the cellular section’s polarity index modifications a solute’s retention variable. As we realized in Chapter twelve.3, even so, a change in here k is not really an effective way to boost resolution in the event the Preliminary worth of k is greater than ten.
, for example, displays retention moments for four weak acids in two cellular phases with approximately identical values for (P^ prime ). Although the purchase of elution is similar for both of those cell phases, Every solute’s retention time is impacted in a different way by the selection of natural solvent.
Column assortment: The stationary section from the column interacts with analytes. Utilizing the Improper column chemistry may lead to lousy resolution. Consider using a unique column that has a stationary stage that provides greater selectivity in your analytes.
A quantitative HPLC Investigation is frequently a lot easier than a quantitative GC analysis due to the fact here a hard and fast quantity sample loop gives a far more specific and exact injection.